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WB蛋白

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WB蛋白免疫檢測:Western blotting(WB)是在蛋白質凝膠電泳和固相免疫測定基礎上發展起來的蛋白質檢測技術,是將SDS-PAGE電泳分離的蛋白質樣本轉移到固相載體(硝酸纖維素NC膜,PVDF膜)上,以固相載體上的蛋白質作為抗原,與合適的抗體結合,再與酶標記的二抗結合,經過底物顯色或放射自顯影對蛋白質進行鑒定及定量的分析技術,其檢測蛋白質的靈敏度為ng級,該技術廣泛應用于醫學、生物學研究領域。
流程:
1、客戶告知實驗分組、編號、檢測樣本類型、種屬、指標及背景設計資料,有具體要求請事先說明;
2、簽訂合同,寄送樣本和抗體,如需我方提供抗體請事先說明;
3、進行實驗,提供防偽版實驗結果,待客戶確定后付清余款,提供原始膠片和實驗報告;
4、利用軟件測定目的蛋白與內參蛋白條帶的光密度值IOD,計算目的蛋白相對表達量。

客戶注意事項
1、抗體:事先咨詢,明確抗體種屬以及是否有該抗體可使用,如無可由雙方協商而定,客戶自己購買提供或我公司提供;

2、標本收集與保存:
組織樣品  新鮮組織放入液氮或-70度保存,組織不少于100mg(約綠豆大?。?;
培養細胞  通過細胞計數取不少于2000000個細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-70℃,避免反復凍融);
血液細胞標本  以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-70℃可長期保存,避免反復凍融)
血清或細胞培養液標本  離心去掉雜質后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可長期保存,避免反復凍融)
3、樣本運輸:可選以下的一種方式寄送標本
組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后加冰袋運輸;
細胞樣本也可以直接快件寄送培養瓶(密封不污染,培養液不漏出,細胞不要長得太滿,50%左右,灌滿培養液);
血清或上清液直接加冰袋寄送(密封液體不漏出,視路途遠近2-3天可到達)。

目前,上海劍鈍生物科技有限公司,主營實驗技術服務、服務、動物模型構建、細胞株、elisa試劑盒等,歡迎廣大科研愛好者前來咨詢選購!

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